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時間：2019-12-26 11:20:34
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編輯：乙肝新聞
慢性乙型肝炎病毒感染的標志是存在高循環水平的非感染性小脂質HBV表面抗原（HBsAg）囊泡。目前的研究認為持續的 HBsAg 消失是慢性乙型肝炎治療的理想終點。 諾華生物醫學研究所研究人員先前已經報道了通過靶向末端核苷酸轉移酶蛋白4A和4B（TENT4A和TENT4B）來抑制 HBsAg 表達的新型小分子RG7834。
在本次 HepDART 2019 大會上，研究人員描述了一個全基因組的 CRISPR 篩查鑒定 HBsAg 表達所需的其他潛在的新型宿主因子，并進一步了解RG7834的機制。
將覆蓋19 050個蛋白質編碼基因的選擇性慢病毒gRNA文庫轉導到表達 Cas9 和整合的1.1mer HBV基因組的HepG2細胞系中。在選擇好后，將細胞用 RG7834（EC20 和EC80）或溶媒（DMSO）處理，并進行 FACS 分選，以檢測細胞內 HBsAg 表達水平的高低。通過下一代測序（NGS）技術在分選的細胞群體中對gRNA進行定量，并在每個比較組之間進行統計富集分析，以鑒定候選基因命中（gene hits）。
研究人員報告了多達60多個基因參與HBsAg的調控，并確定了 RG7834 的新功效靶標，包括含14個（ZCCHC14）蛋白的鋅指CCHC型。研究顯示ZCCHC14與TENT4A / B一起在轉錄后調控元件位點內結合HBV RNA，并通過HBV RNA拖尾穩定HBsAg表達。
綜上，全基因組CRISPR篩選為確定控制HBsAg表達的新基因和途徑提供了強有力的策略。 此外，研究人員展示了這種無偏見的方法作為剖析HBsAg表達抑制劑潛在機制的工具。 特別是，研究人員提供了ZCCHC14在通過TENT4A / B作為非常規TRAMP樣復合體的一部分通過HBV RNA拖尾增強HBsAg mRNA的穩定性中發揮作用的第一個證據。 這些結果提示，潛在新的治療靶標可中斷慢乙肝中的HBV復制和基因表達。（更多肝病新藥研究信息敬請關注“肝臟時間”微信公眾號）！
信息來源：A genome-wide CRISPR screen identifies ZCCHC14 as a host factor required for hepatitis B surface antigen production
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